生物工程生产胰岛素的步骤。想解决目的基因如何获取？

一、生物工程生产胰岛素的步骤。想解决目的基因如何获取？

1，目的基因的获取：通过各种手段（基因文库，化学合成，PCR技术等）获取胰岛素基因

2，基因表达载体的构建：一般采用质粒，用同一种限制酶切割质粒和切取目的基因（胰岛素基因）使产生相同的粘性末端，将切取的胰岛素基因片段插到质粒的切口处，再用DNA连接酶使质粒和胰岛素基因结合成重组质粒

3，将重组质粒导入受体细胞（如大肠杆菌，用感受态细胞法即Ca+处理）

4，检测与鉴定目的基因获得途径：

1限制性内切酶酶切法

2利用PCR技术直接扩增目的基因

3目的基因的化学合成

4通过构建基因组文库或CDNA文库分离目的基因

5反向转录法分离目的基因

希望对你有帮助。。。

二、1905年我国在国际上首次人工合成什么结晶？

1965 年9月17日，发生了写入中学化学教材的这件大事——上海生物化学研究所首次人工合成结晶牛胰岛素，这也是世界首次合成具有活性的人工蛋白。

1958年，中科院提出了“完成世界上第一次人工方法合成蛋白质”的目标之后，这一提议得到各级部门的支持。同年12月，项目正式启动。当时的中国学界可以用“一穷二白”来形容。

要人工合成蛋白质，蛋白质的结构是什么？生物活性是什么？物理特性是什么？这几个标准就成为先要搞清的问题。所以，美好愿望的实现首先转化为对“美好”标准的研究，而选择胰岛素作为人工合成蛋白的对象在当时更如“云里雾里”。

由王应睐等专家组成的团队先是对上述问题展开了攻关，随即利用当时简陋的条件解决了氨基酸原料的供应问题及硫硫键能否重新链接成胰岛素蛋白分子的难题。

最终，历经7年的日夜奋斗以及无数的波折，我国的科研团队终于完成了世界首次人工合成牛胰岛素，这也是多肽链物质首次被人工合成。

结晶牛胰岛素的合成有着极其重要的意义，它代表人类向合成有生命活性蛋白质领域迈开了重要的一步。后世学界也评价此次合成工作是中国科研工作者最接近诺奖的一次。但冷静的思考，此次合成工作没有获得诺奖也有内在的原因。

首先，诺奖只颁给个人，而此次工作由团队完成，没有人会将此功居为己有，所以即便获奖也不会有人去领奖；

第二，纵观诺奖历史，以表彰学术贡献为初衷的评选也从未真正的公平，即便这次世界首次人工合成牛胰岛素的学术价值再大、对人类社会的贡献再大，和诺奖“擦肩”也十分正常。

三、糖尿病患者选择药物的原则是什么

治疗糖尿病用到的药物多种多样，随着这些药物不断的推陈出新，药物的选择也是由

讲究的，为了能让糖尿病患者少走弯路，找到适合自己的药物，了解选药的标准很重要。

下面是糖尿病治疗专家提出的选择降糖药的一些原则：

一、根据糖尿病的不同类型选药：1型糖尿病患者自始至终都应使用胰岛素治疗。2型糖尿病患者一般选用口服降糖药治疗。但在下列情况下需用胰岛素治疗：1、饮食、运动及口服降糖药效果不好;2、出现严重急、慢性并发症(如酮症酸中毒、糖尿病视网膜病变、尿毒症);3、处于急性应激状态(如严重感染、大型创伤及手术、急性心脑卒中等)4、怀孕期。

二、根据2型糖尿病的自然病程选药：在2型糖尿病早期，胰岛素抵抗伴代偿性的胰岛素水平升高，首先应该考虑选择改善胰岛素抵抗和(或)延缓葡萄糖吸收的药物。随着病情进一步发展，患者胰岛素分泌功能逐渐衰退，此时需再加用促进胰岛素分泌的药物。

三、根据高血糖类型选药：如果空腹血糖不高，只是餐后血糖高，则首选糖苷酶抑制剂(如拜糖平)或苯甲酸衍生物(如诺和龙);如果空腹和餐后血糖都高，治疗开始即可联合两种作用机制不同的口服药物，如“磺脲类+双胍类”或者“磺脲类+噻唑烷二酮(罗格列酮和吡格列酮)类”。另外，对于初始时空腹血糖大于13.9mmol/L、随机血糖16.7mmol/L的患者，可给予短期胰岛素强化治疗，消除葡萄糖毒性作用后再改用口服药。

四、根据体型选药：理想体重(千克)=身高(厘米)-105，如果实际体重超过理想体重10%，则认为体型偏胖，首选双胍类或拜糖平。因为这类药物有胃肠道反应和体重下降的副作用，对于超重或肥胖患者来说，正好化害为利;如果实际体重低于理性体重10%，则认为体型偏瘦，应该优先使用胰岛素促分泌剂(包括磺脲类和苯甲酸衍生物(如诺和龙)，因为该类药物有致体重增加的副作用，对于消瘦者，正好一举两得。

五、根据年龄选药：由于老年糖尿病患者对低血糖的耐受能力差，因此，不宜选用长效、强力降糖药物(如优降糖)，而应选择服用方便、降糖效果温和的短效降糖药物(如诺和龙、糖适平)。另外，为了避免低血糖带来的风险，老年糖尿病的血糖控制目标适当放宽。儿童1型糖尿病主要用胰岛素治疗;二甲双胍是目前唯一被美国FDA批准用于儿童2型糖尿病治疗的口服降糖药。

六、根据有无合并症选药：如果糖尿病患者同时伴有肥胖、高血压、高血脂、冠心病等疾病，首先考虑使用双胍类、噻唑烷二酮类和糖苷酶抑制剂，这些药物既可降低血糖，又能改善心血管病的危险因素;如果糖尿病患者有胃肠道疾病，最好不要使用双胍类和糖苷酶抑制剂;如果患者有慢支、肺气肿、心衰等缺氧性疾病，禁用双胍类药物，以免引起乳酸酸中毒;如果患者有肝病，慎用噻唑烷二酮类;如果患者有轻度肾功能不全，最好选用主要经胆道排泄的降糖药如糖适平、诺和龙;如果严重的心肺肾等全身性疾病，则最好使用胰岛素。

七、根据糖尿病患者对服药的依从性选药：对于经常出差，进餐不规律的糖尿病患者，选择每天只需服药一次的药物(如格列美脲)更为方便适合。患者顺应性更好，对于经济不宽裕的患者，还要将价格因素考虑在内，以确保患者能够维持长期治疗。

糖尿病患者只有选择适合自己的降糖药物，才能更好的控制自己的病情，但是，糖尿病治疗专家说到，这些只是一个大概的范围，如果说情况特殊的话，还是要先咨询医生。